Mx基因稀有密码子和mRNA结构及大肠杆菌表达 优化

通过对稀有密码子和mRNA翻译起始区二级结构的分析, 构建了4种重组表达菌株BL21(DE3)/pET-Mx, Rosseta(DE3)/pET-Mx, BL21(DE3)/pGEX-Mx和Rosseta(DE3)/pGEX-Mx, 在大肠杆菌中进行Mx基因的表达, Rosseta(DE3)/pET-Mx和Rosseta(DE3)/pGEX-Mx重组表达菌中都获得了表达, Western blotting检测到了特异的75 kDa表达产物。实验结果证明稀有密码子和mRNA翻译起始区二级结构对Mx 蛋白表达都有影响, 选择适用于稀有密码子表达的菌株Rosetta(DE3)有利于Mx蛋白的表达, 同时翻译起始区二级结构能值较低的表达载体pGEX-Mx获得的表达量明显增高。实验中首次获得了重组表达鸡全长Mx蛋白的大肠杆菌重组菌。     

甲醚菊酯和溴氰菊酯在果蝇幼虫外周神经系统的协同毒理作用

本文运用细胞内微电极记录技术研究了甲醚菊酯和溴氰菊酯对果蝇Drosophila melanogaster幼虫神经一肌肉突触兴奋性接点电位(EJP₅)的影响。用甲醚菊酯(1.49x10^-8m01/L)处理后引起果蝇EJP₅的自发释放增加和刺激后的重复后自发释放。而用溴氰菊酯(1.0x10^-8mol/L)处理的则无明显影响。这显示甲醚菊酯对果蝇外周神经主要为I型毒理作用。而溴氰菊酯则主要为Ⅱ型作用,甲醚菊酯和溴氰菊酯联合应用后,则产生兼具I型和II型特征的自发释放或诱发EJP₅发放。自发释放或重复后自发释放的频率和幅值随联合处理中甲醚菊脂和溴氰菊酯的配比而变化。这些结果说明甲醚菊酯和溴氰菊酯对果蝇幼虫外周神经的毒理具有协同作用。     

促肾上腺皮质激素释放因子介导低氧应激抑制淋巴细胞转化…

本实验以模拟高原低氧方法观察鼠淋巴细胞对丝裂原（ＣｏｎＡ）的反应性及促肾上腺皮质激素释放因子（ＣＲＦ）介导急性低氧的免疫调节作用。实验结果表明：急性低氧可抑制大鼠外用周血淋巴细胞转化,高原土著动物高原鼠兔（Ｏｃｈｏｔｏｎａ ｃｕｒｏｎｉａｅ）则不表现这种低氧作用;肾上腺完整和肾上腺摘除大鼠第三脑室给予外源性ＣＲＦ１μｇ,表现出与低氧作用类似的淋巴细胞转化下降现象;低氧时第三脑室给予高效价ＣＲＦ抗血     

天然常绿阔叶异龄幼林胸径的Weibull分布及动态预测

 常绿阔叶林是我国亚热带东部地区的地带性自然植被。本次在浙江西北部研究的44块常绿阔叶林样地的主要树种是青冈(Cyclobalanopsis glauca)、石栎(Lithocarpus glaber)、甜槠(Castanopsis eyrei)、木荷(Schima superba)和苦槠(Castanopsis sclerophylla)等。Weibull函数能够较灵活地用来表达常绿阔叶异龄林的这种具有不同偏度和峭度变化的直径分布。随着林分平均胸径(D)的增大,常绿阔叶异龄林的胸径分布表现出由指数形转向倒J形至正态形。偏度由正偏趋于负偏．峭度逐渐变小．多数相应增大的动态分布规律。采用参数预估法研究建立了以D为自变量的天然常绿阔叶异龄林直径分布动态模型及其预测数表．可供合理经营等参考使用。     

人类基因组计划研究进展

本文简要介绍了人类基因组计划的研究目标、内容、策略和人类基因组计划研究的新进展,如遗传图谱、转录图谱的构建、序列分析、疾病基因的鉴定等。同时还介绍了可能加快基因组全序列分析的新策略和基因和基因组后研究的几种方法。     

茂兰喀斯特山地广东松种群结构和动态初步研究

 广东松(Pinus kwangtungensis)是国家三类重点保护植物,为贵州茂兰国家自然保护区喀斯特山顶森林群落演替先锋树种和建群种之一。基于大小结构分析法、矩阵模型和分布格局距离方法,对茂兰喀斯特山地广东松种群结构和动态进行了初步研究。结果表明：(1)广东松种群大小结构近倒金字塔形,为中衰至衰退型种群;(2)广东松年龄(E)和胸径(D)的回归方程为E=59.968／(4.041-lnD);(3)广东松种群分布格局为斑块内种群个体集聚分布,斑块个体均匀分布;(4)广东松各径级度的种群密度(DS)随径级度(DG)呈S形变化,DS=1／(0.0584+0.018e-DG);(5)广东松种群为先锋种群,也能在山顶特殊生境中一定时期内与其它种群一起形成稳定群落;(6)分布格局距离方法能有效地用于亚热带森林树种的种群分布格局研究,矩阵模型能在—定程度上反映森林树种种群的数量和结构动态。     

口服福氏2a和宋内氏痢疾双价活菌苗FS人群粪抗体检测

本文测试了经三剂（共１×１０１１ｃｆｕ）ＦＳ双价活菌苗口服免疫的１６３名中学生免前及免后１、３和６个月时特异性ｓＩｇＡ粪抗体水平。结果发现,服苗后半年内,分别有７１％和７７．９％的免疫人群特异性抗福氏２ａ和抗宋内氏ｓＩｇＡ有四倍以上升高,且有８２．９％的人群粪便中,两种抗体的应答状况表现一致,说明该菌苗具有良好的免疫原性,并具有双价菌苗的免疫学特性。     

Taq DNA耐热聚合酶在大肠杆菌中的克隆和高表达

从水生栖热菌(Thermus aquaticus)YT-1中分离得到的Taq DNA 聚合酶是一种广泛应用于PCR的耐热DNA聚合酶。由于天然菌株酶产量较低,培养条件要求严格,酶的纯化过程极为繁琐而使产品成本较高,因而促使人们构建适合于大规模生产的基因工程菌株。已有人分别通过不同的途径,使用不同的载体,成功地在大肠杆菌菌株中表达了Taq 耐热DNA聚合酶基因。我们通过与前人不同的途径,把这一基因克隆到大肠杆菌的载体质粒pJLA503上并使其得以高表达,为降低生产成本和进一步研究该酶的各种特性提供了有利条件。     

低氧对氧生大鼠下丘脑促勇上腺皮质激素释放激素发育的…

本文研究模拟高原低氧下新生和胚胎大鼠发育时,下丘脑内肿肾上腺皮质激素及垂体环磷酸腺苷水平的变化,结果表明：５ｋｍ海拔高度抑制下丘脑ＣＲＦ的发育,当以育至２５天和３０天时,ＣＲＦ含量分别为对照组的６４．８％和５７．９％。此时,体重分别为４７．８％和５２．９％,３０天时,ｃＡＭＰ为２０．８％,本研究还显示,在７ｋｍ海拔高度已怀孕大鼠难以完成正常的妊娠和胎儿发育过程,５ｋｍ海拔高拔高度暴露１７天时,胚胎     

EGF及IGF－Ⅰ对UMR106细胞增殖及β微管蛋白表达的影响

应用３Ｈ－ＴｄＲ参入,流式细胞技术和Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ等方法,观察了ＥＧＦ和ＩＧＦ－Ⅰ对ＵＭＲ１０６细胞增殖及β微管蛋白表达的影响。结果显示,两种生长因子分别处理ＵＭＲ１０６细胞１２ｈ,在促进细胞ＤＮＡ合成的同时,β微管蛋白ｍＲＮＡ的表达量明显提高。运用间接免疫荧光技术及Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ方法,研究发现两种生长因子可使微管聚合及微管蛋白的表达有所增加。提示β微管蛋白的合成及聚合与细胞增殖间可能存在着一定的相互联系．